细胞冻存是保存细胞的重要手段，通过低温延缓细胞生命活动。这项技术使细胞可以长期保存，便于在需要时复苏用于各类实验。19世纪末，科学家们开始探索低温对生物组织的影响。早期研究显示，单纯冷冻会导致细胞内冰晶形成及渗透压失衡，最终导致细胞死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出的“冰晶损伤”理论为后续的冷冻保护研究奠定了基础。

1949年，英国科学家在研究精子冷冻时意外发现甘油能显著提高冷冻后精子的存活率。作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），甘油可以进入细胞内部，降低冰点并减少冰晶形成。它通过平衡细胞内外的渗透压，避免细胞在冷冻过程中因脱水而破裂。1959年，科学家又发现二甲基亚砜（DMSO）同样具有优异的冷冻保护效果，尤其适合哺乳动物细胞。DMSO相较于甘油更易穿透细胞膜且毒性较低，迅速成为细胞冻存的标准保护剂之一。

1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”。该假说指出，快速冷冻时细胞内冰晶形成会破坏细胞膜和细胞器，而慢速冷冻则导致细胞外冰晶形成，引起细胞脱水和胞内溶质浓度升高，从而造成化学毒性。这一理论为程序化慢冻法提供了科学依据。大多数细胞的冻存遵循“慢速冻存”原则，通过程序化冷冻仪控制降温速率（通常为1°C/min），使细胞在冷冻过程中逐步脱水，最大限度地避免细胞内结冰，从而显著提高冻存细胞的存活率。

研究表明，5%-10%的DMSO最为适宜细胞冻存，具体比例需根据细胞种类进行调整。小尚的经验表明，8%DMSO适合大多数细胞系。同时，还需根据细胞的培养难度调整血清比例。对于较难培养的细胞，应增加血清的比例；而对于脆弱细胞，则可采用血清+DMSO联合冻存，减少培养基的使用。常用冻存液的配方包括92% FBS+8%DMSO（推荐给新手）或92%完全培养基+8%DMSO（推荐给高手）。

金年会金字招牌诚信至上，尚恩生物提供的特级胎牛血清呈浅黄色，经过检测确认无菌、无支原体和相关牛源病毒，低内毒素（＜3EU/mL）且不含外源激素、生长因子和抗生素等，适用于培养肿瘤细胞、原代细胞及大部分干细胞。货号：SNS-002。尚恩非程序性细胞冻存液（无血清）是一种不含血清且不需要程序降温步骤的冻存液，可以重悬细胞后直接放入超低温冰箱，极大方便了细胞冻存操作，同时减少了血清对细胞和实验的影响。货号：SNR-006。

无论使用何种冻存液，都建议在正式冻存前进行冻检：即在冻存24小时后复苏一支细胞，确认状态良好后再进行大规模冻存。同时，在冻检成功之前至少要保留一瓶细胞培养，以免复苏失败导致细胞绝种。

关于公司简介，武汉尚恩生物技术有限公司位于武汉东湖高新区光谷生物城，专注于细胞及其系列产品的研发、生产和服务。公司拥有标准化GMP实验室、动物房，并已通过ISO9001:2015质量管理体系认证，荣获多项高新技术企业荣誉。我们的产品涵盖细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础与完全培养基以及辅助试剂等，致力于为客户提供一站式细胞及培养配套产品采购服务。同时，尚恩生物为国内各大高校及生物研究机构提供完备的细胞资源库和相关试剂，始终追求卓越产品质量，致力于满足科研人员的需求。

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