金年会金字招牌诚信至上的人β干扰素（IFN-β）Elisa试剂盒是专为科学研究而设计的，不可用于临床医学诊断。本文将详细介绍该试剂盒的使用方法、样本处理及相关注意事项。

试剂盒原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。通过将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过适当的温育和彻底洗涤后，使用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下，最初形成蓝色，而后在酸性环境中转变为黄色，颜色深浅与adropin（AD）浓度呈正相关。最终通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），以计算样品浓度。

样本收集、处理与保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，避免细胞刺激，采血后以3000转离心10分钟快速分离血清和红细胞。
2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝，3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液：以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织与生理盐水混合并捣碎，3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存：如未能及时检测样本，请按一次用量分装并在-20℃下冻存，避免重复冻融，并确保样品在室温下充分解冻。

所需设备

1. 酶标仪（波长450nm）
2. 精确的加样器及相应的枪头（05-10µL、2-20µL、20-200µL、200-1000µL）
3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 本试剂盒应储存在2-8℃，使用前需在室温下平衡20分钟；浓缩洗涤液可能会结晶，需水浴加热以溶解。
2. 使用后未用的试剂应立即放回自封袋中，以低温干燥保存。
3. 标准品S0（浓度为0）可视为阴性对照；实验应按说明书的稀释要求进行，最终计算结果需乘以5。
4. 操作时须严格按照说明书中的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分在使用前必须充分摇匀。

试剂盒组成

本试剂盒包括：
- 96孔配置微孔酶标板（12孔×8条）
- 标准品及相关试剂（含浓度0、25、50、100、200、400pg/mL）
- 检测抗体和洗涤缓冲液等，可根据说明书进行稀释。

操作步骤

1. 从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取所需板条，余下板条置于4℃保存。
2. 设定标准品孔及样本孔，标准品各加不同浓度的标准品50µL；样本孔中先加待测样本10µL，再加样本稀释液40µL。
3. 非空白孔中加入HRP标记的检测抗体100µL，并用封板膜密封，37℃恒温水浴孵育60分钟。
4. 弃去反应液，进行洗板，步骤重复5次。
5. 桶每孔加入底物A、B各50µL，在37℃避光孵育15分钟后，加入终止液50µL，并在450nm波长下测定OD值。

结果判断

根据标准品浓度与OD值绘制标准曲线，通过线性回归方程计算样本浓度。
性能指标包括准确性（R值≥0.9900）、灵敏度（检测浓度<10pg/mL）、特异性（不发生交叉反应）、重复性（变异系数<15%）等。

免责声明

金年会金字招牌诚信至上提醒您，本试剂盒仅供研究使用，严禁用于临床实验或人体实验，相关后果由实验者自行承担；同时，实验者需严格按照说明书操作，违规操作后果自负。